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蛋白marker需要加loading buffer吗

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lkm1990517

差不多 这东西要求不严的 直接拿loading buffer煮都可以达到裂解的效果
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hfzhangwei1987

蛋白电泳1×loadingbuffer可以配制出来，但是却很难在实际使用的时候用上比如说蛋白电泳5×loadingbuffer，在使用的时候也就是1个体积的loadingbuffer要加上4个体积的蛋白样品。这样最后的蛋白电泳loadingbuffer就被稀释到1×loadingbuffer如果说1×loadingbuffer就是说1体积的loadingbuffer要加上0体积的蛋白样品，这样的loadingbuffer配制出来也没法用。所以说蛋白电泳1×loadingbuffer是指应用时的情况，而不是配制的浓度
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fdhhvgh

看你的2XPFU是什么形式,如果是mix的形式,一般已经有染料在里面了,可以看到mix的溶液就是蓝色,这样的话,样品可以直接上样的.
但是如果你加的溶液都是透明的,完成后还是需要加loading buffer.普通自己配的loading都是5X的,就按照样品：loading=4:1的比例混合就可以了.
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john333s

这个是看你的目的了，如果你要跑还原性电泳，那么样品需要用含有β-巯基乙醇的loading buffer沸煮5分钟，这样使蛋白间的二硫键在还原剂β-巯基乙醇的作用下被打开，得到的是蛋白的一级结构。而非还原的电泳就是在loading buffer中不加入还原剂β-巯基乙醇，这样的电泳比较能够真实的反应蛋白当时的情况，比如二聚体或者多聚体之类的。
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